稀釋疫苗之前應對使用的疫苗逐瓶檢查，尤其是名稱、有效期、劑量、封口是否嚴密、是否破損和吸濕等。對需要特殊稀釋液的疫苗，應用指定的稀釋液。其他疫苗一般可用生理鹽水或蒸餾水稀釋。稀釋液應是清涼的，這在天氣炎熱時尤應注意。稀釋液的用量在計算和稱量時均應細心和準確。稀釋過程應避光、避風塵和無菌操作，尤其是注射用的疫苗應嚴格無菌操作。稀釋過程一般應分級進行，對疫苗瓶應用稀釋液沖洗2～3次。稀釋好的疫苗應盡快用完，尚未使用的疫苗也應放在冰箱或冰水桶中冷藏。
對于液氮保存的馬立克氏病疫苗的稀釋，更應小心，生產廠家有操作程序時，應嚴格按提供的程序執行，如無現成的程序，可參考如下的注意事項。
（一）一般性要求
1．液氮保存的疫苗必須有指定的專業技術人員負責保管和稀釋。
2．定期測定和登記罐內的液氮量，液氮量不足時應及時補充。
3．液氮罐應存放于安全的地方，與宿舍、辦公室、倉庫等保持一定的距離。
4．帶液氮罐領取疫苗時應由專車運送，不得用客運交通工具運送，如需經火車等長途運輸，則必須征得有關部門的同意，并采取相應防范措施后再作運輸。
(二)疫苗的稀釋過程
1．操作者應先戴好防護面具和手套。
2．稀釋液平時應于4℃保存，稀釋前稀釋液溫度應為15～27℃（按廠家規定辦）。
3．按疫苗廠家的要求，準備好15～27℃的水浴箱（桶）以及長柄鉗1～2支、冰塊、托盤、水桶、自來水、注射器、18號針頭等備用。
4．打開液氮罐，取出一支疫苗后迅速將其余疫苗放回液氮罐內。
5．立即將已取出的疫苗放入上述已準備好的溫水浴中，使疫苗迅速解凍。
6．待疫苗完全溶解后，立即取干布拭干，甩動疫苗瓶，使疫苗瓶頸部不含疫苗液。在盡可能遠離操作者面部及身體的地方把疫苗瓶從頸部折斷。
7．取注射器套上18號針頭，抽取溫度為15～27℃之間（按廠家規定辦）的稀釋液1ml～2ml，再將疫苗液抽入注射器內，輕輕混勻后注入稀釋液瓶中，然后再抽取稀釋液連續沖洗疫苗瓶2～3次，并將沖洗液加入到稀釋液瓶中。
8．輕輕地搖動已加入疫苗的稀釋液，使疫苗均勻地分布在稀釋液中。
9．把稀釋好的疫苗保持在15～27℃（按廠家規定辦），在注射期間也應保持在這一溫度范圍內。
10．已稀釋的疫苗必須在稀釋后一小時內用完。
五、疫苗的接種途徑
免疫接種時操作上的失誤，是造成免疫失敗的常見原因之一。不同免疫接種途徑的優缺點及注意事項如下。
（一）飲水 飲水免疫避免了逐只抓捉，可減少勞力和應激，但這種免疫接種受影響的因素較多，操作過程應注意：
1．疫苗應是高效的活毒疫苗。
2．使用的飲水應是清涼的，水中不應含有任何能滅活疫苗病毒或細菌的物質。
3．在飲水免疫期間，飼料中也不應含有能滅活疫苗病毒和細菌的藥物。
4．飲水中應加入0.1%～0.3%的脫脂乳或山梨糖醇,以保護疫苗的效價。
5．為了使每一只雞在短時間內能均勻地攝入足夠量的疫苗，在供給含疫苗的飲水之前2h～4h應停止飲水供應（視環境溫度而定）。
6．稀釋疫苗所用的水量應根據雞的日齡及當時的室溫來確定，使疫苗稀釋液在1h～2h內全部飲完。
7．飲水器應充足，使雞群2/3以上的雞只同時有飲水的位置。
8．飲水器不得置于直射陽光下，如風沙較大時，飲水器應全部放在室內。
9．夏季天氣炎熱時，飲水免疫最好在早上完成。
（二）滴眼滴鼻 滴眼滴鼻免疫接種如操作得當，往往效果比較確實，尤其是對一些預防呼吸道疾病的疫苗，經滴眼滴鼻免疫效果較好。當然，這種接種方法需要較多的勞力，也會造成一定的應激，如操作上稍有馬虎，則往往達不到預期的目的。應注意：
1．稀釋液必須用蒸餾水或生理鹽水，最低限度應用冷開水，不要隨便加入抗生素或其他化學藥物。
2．稀釋液的用量應準確，最好根據自己所用的滴唧或針頭事先滴試，確定每毫升多少滴，然后再計算疫苗稀釋液的實際用量。
3．為使操作準確無誤，一手一次只能抓一只雞，不能一手同時抓幾只雞。
4．在滴入疫苗之前，應把雞的頭頸擺成水平的位置（一側眼鼻朝天，另一側眼鼻朝地），并用一只手指按住向地面的一側鼻孔。
5．在將疫苗液滴加入眼和鼻以后，應稍停片刻，待疫苗液確已被吸入后再將雞輕輕放回地面。
6．應注意做好已接種和未接種禽之間的隔離，以免走亂。
7．為減少應激，最好在晚上弱光環境下接種，也可在白天適當關閉門窗后，在稍暗的光線下接種。
（三）肌肉或皮下注射 肌肉或皮下注射免疫接種的劑量準確、效果確實，但耗費勞力較多，應激較大，在操作中應注意：
1．疫苗稀釋液應是經消毒而無菌的，不要隨便加入抗菌藥物。
2．疫苗的稀釋和注射量應適當，量太小則操作時誤差較大，量太大則操作麻煩，一般以每只0.2ml～1ml為宜。
3．使用連續注射器注射時，應經常核對注射器刻度容量和實際容量之間的誤差，以免實際注射量偏差太大。
4．注射器及針頭用前均應消毒。
5．皮下注射的部位一般選在頸部背側，肌肉注射部位一般選在胸肌或肩關節附近的肌肉豐滿處。
6．針頭插入的方向和深度也應適當，在頸部皮下注射時，針頭方向應向后向下，與頸部縱軸基本平行。對雛雞的插入深度為0.5cm～1cm，日齡較大的雞可為1cm～2cm。胸部肌肉注射時，針頭方向應與胸骨大致平行，插入深度雛雞為0.5cm～1cm，日齡較大的雞可為1cm～2cm。
7．在將疫苗液推入后，針頭應慢慢拔出，以防疫苗液漏出。
8．在注射過程中，應邊注射邊搖動疫苗瓶，力求疫苗的均勻。
9．應先接種健康群，再接種假定健康群,最后接種有病的雞群。
10．關于是否一只雞一個針頭及注射部位是否消毒的問題，可根據實際情況而定。但吸取疫苗的針頭和注射雞的針頭則應絕對分開，盡量注意衛生以防止因免疫注射引起傳染病的擴散或引起接種部位的局部感染。
（四）氣霧免疫 可節省大量的勞力，如操作得當，效果較好，尤其是對呼吸道有親嗜性的疫苗效果更佳，但氣霧也容易引起雞群的應激，尤其容易激發慢性呼吸道病。氣霧免疫中應注意：
1．氣霧前應對氣霧機的各種性能進行測試，以確定霧滴的大小、稀釋液用量、噴口與雞群的距離（高度）、操作人員的行進速度等，以便在實施時參照進行。
2．疫苗應是高效的。
3．氣霧前后幾天內，應在飼料或飲水中添加抗菌藥物，預防慢性呼吸道病。
4．疫苗的稀釋應用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、開水或井水。
5．稀釋液中應加入0.1%的脫脂乳或3%～5%甘油。
6．稀釋液的用量因氣霧機及雞群的平養、籠養密度而異，應嚴格按說明書推薦用量使用。
7．嚴格控制霧滴的大小，雛雞用霧滴的直徑為30μm～100μm，成雞為5μm～30μm。
8．氣霧期間，應關閉雞舍所有門窗，停止使用風扇或抽氣機，在停止噴霧后20min～30min，才可開啟門窗和啟動風扇（視室溫而定）。
9．氣霧時，雞舍內溫度應適宜，溫度太低或太高均不適宜進行氣霧免疫，如氣溫較高，可在晚間較涼快時進行。
10．雞舍內的相對濕度對氣霧免疫也有影響，一般要求相對濕度在70%左右最為合適。
11．實施氣霧時，氣霧機噴頭在雞群上空50cm～80cm處，對準雞頭來回移動噴霧，使氣霧全面復蓋雞群，使雞群在氣霧后頭背部羽毛略有潮濕感覺為宜。
（五）翼膜刺種 翼膜刺種可用于雞痘疫苗的接種，一般每1 000羽份疫苗用25ml生理鹽水稀釋，用接種針（或注射器）蘸取疫苗稀釋液，在雞翅膀內側無血管的翼膜處刺種，小雞刺一針，大雞刺二針。做翼膜刺種時，一定要確定接種針已蘸取了疫苗稀釋液，使每一只被接種雞接種到足量的疫苗。
（六）滴肛或擦肛 滴肛或擦肛免疫目前只用于強毒型傳染性喉氣管炎疫苗，在對發病雞群進行緊急預防接種時，可將1 000頭份的疫苗稀釋于25ml～30ml生理鹽水中，將雞抓起，頭向下肛門向上，用接種刷（小毛筆或棉拭子）蘸取疫苗在肛門黏膜上刷動3～4次。接種時應注意只能將疫苗稀釋液擦在肛門上，不能讓疫苗稀釋液碰到雞的皮膚或羽毛或落到地面上，造成環境污染和疾病的擴散。